换一批摘要目的构建含有融合自杀基因FCU1的真核细胞表达载体pEGFP-FCU1,并转染肝癌细胞SMMC7721,初步探讨FCU1/5-氟胞嘧啶(5-FC)系统对体外培养细胞的生长抑制作用.方法用SmaⅠ,XhoⅠ两种限制性内切酶分别切割质粒pEGFP-C1和pCIneoFCU1,所得载体片断和目的基因片断连接后转化,阳性重组子转染肝癌细胞SMMC7721,以绿色荧光蛋白基因为报告基因,用G418筛选出阳性细胞克隆后,进行体外药物敏感实验.结果酶切鉴定重组子阳性克隆率约为60%,转染成功的细胞在荧光显微镜下可见绿色荧光;转染的细胞在5-FC作用下其生长抑制率明显高于未转染细胞的生长抑制率,且旁观者效应显著.结论自杀基因FCU1真核表达载体构建正确,转染细胞成功并获稳定表达,FCU1/5-FC系统对肝癌细胞SMCC7721具有实验性的基因治疗作用.
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DOI
10.3870/j.issn.1672-0741.2004.04.010
发布时间
2004-09-23（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30171061）
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