骨桥蛋白在缺氧对滋养细胞侵袭力影响机制中的作用
Effects of Hypoxia on Expression of Osteopontin and Invasive Ability of Human Placental Choriocarcinoma Trophoblast Cells
摘要目的 研究不同氧浓度下滋养细胞骨桥蛋白(osteopontin,OPN)的表达与相应氧浓度下滋养细胞侵袭力的相关性,探讨OPN在缺氧对滋养细胞侵袭力影响机制中的作用.方法 利用气体混配缺氧装置(QT-MTX-3),模拟子痫前期胎盘缺氧的低氧环境,培养人胎盘绒毛膜癌滋养细胞系BeWo细胞.采用Western 印迹和实时荧光定量PCR方法,检测不同氧浓度对BeWo细胞OPN表达的影响.采用Transwell侵袭模型,探讨缺氧对BeWo细胞侵袭力的影响.结果 Western blot检测结果显示,缺氧48 h后,低氧组OPN蛋白的表达水平均明显下降,且2%O2组OPN蛋白下降更显著.实时荧光定量PCR检测结果表明,缺氧对滋养细胞OPN mRNA的表达影响呈现出浓度时间依赖性,随着氧浓度的降低和缺氧时间的延长,OPN mRNA的表达呈显著下降趋势.Transwell侵袭实验结果显示,与常氧对照组相比,低氧组细胞侵袭力明显降低,8%O2组和2%O2组的细胞浸润指数分别为0.298 8和0.091 7(P<0.01).采用Spearman相关分析法,比较OPN表达水平与BeWo细胞侵袭力的相关性,结果显示,随着OPN表达的降低,滋养细胞的侵袭力进一步下降,OPN表达水平与侵袭指数成正相关(rs=0.944,P<0.01).结论 缺氧降低滋养细胞OPN的表达,表现为浓度和时间依赖性;随着OPN表达的降低,滋养细胞的侵袭力下降.OPN低表达可能是子痫前期滋养细胞侵袭力下降的分子机制之一.
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