换一批β2-spectrin的siRNA对AML-12肝细胞增殖特性的影响
Effect of siRNA against β2-spectrin on Proliferation of AML-12 Cells
摘要目的 应用特异性siRNA干扰小鼠肝细胞株AML-12中β2-spectrin表达,检测AML-12细胞增殖凋亡以及细胞周期的改变.方法 化学合成β2-spectrin特异性siRNA,分别转染AML-12细胞,荧光定量PCR和Western blot 确定其抑制效果.AML-12细胞经TGF-β细胞因子处理4 h后,转染β2-spectrin特异性siRNA,48 h后,BrdU标记法以及流式细胞术检测β2-spectrin沉默前后AML-12细胞增殖、凋亡以及周期变化;共聚焦技术检测干扰β2-spectrin表达对TGF-β/Smad信号通路中Smad3、Smad4核定位的影响.结果 siRNA可以高效特异沉默β2-spectrin 的表达.流式细胞术检测显示,β2-spectrin沉默促进AML-12细胞增殖,抑制凋亡,S期细胞比例显著升高.免疫荧光结果 显示,TGF-β处理后,Smad3、Smad4表达定位于细胞核,沉默β2-spectrin干扰Smad3、Smad4细胞核内定位.结论 沉默β2-spectrin的表达促进AML-12增殖,抑制凋亡,促进细胞向S期转化.其机制可能是通过干扰Smad3、Smad4核定位而抑制TGF-β/Smad信号通路,进而发挥诱导凋亡效应.
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栏目名称
DOI
10.3870/j.issn.1672-0741.2013.01.002
发布时间
2013-04-09（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金（30600277）
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