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Sec3对中性粒细胞弹性蛋白酶诱导的气道上皮细胞黏蛋白分泌的影响

Effects of Sec3 on Mucin Secretion Induced by Neutrophil Elastase in Airway Epithelial Cells

摘要目的 探讨栓链因子复合物亚基Sec3对中性粒细胞弹性蛋白酶(NE)诱导的气道上皮细胞黏蛋白(MUC)分泌的影响.方法 体外培养人气道上皮细胞16HBE,随机分为8组:空白对照组、表皮生长因子受体(EGFR)磷酸化抑制剂AG1487组、Sec3 siRNA组、阴性siRNA对照组、NE组、NE+AG1478、NE+ See3 siRNA组、NE+阴性siRNA组.采用Western blot法检测Sec3蛋白及pEGFR的相对含量;ELISA、RT-PCR法分析细胞培养上清液中MUC5AC的相对含量及细胞中MUC5AC mRNA水平.结果 Sec3 siRNA转染显著降低Sec3蛋白表达,提示转染成功,且加入NE对转染效果无干扰.单纯NE刺激组上清液中MUC5AC含量,细胞中MUC5AC mRNA、pEGFR水平显著高于空白对照组(P<0.01),AG1487可明显抑制上述刺激作用;转染Sec3 siRNA可阻断MUC5AC分泌(P<0.01),但并不影响其转录水平表达(P>0.05).结论 在NE诱导的人气道上皮黏液高分泌过程中,栓链因子复合物亚基Sec3对黏蛋白出胞有重要的介导作用.

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