丙戊酸钠对肺癌细胞MICA蛋白表达的影响及其信号转导机制

Effect of Sodium Valproate on Expression of MICA Protein in Lung Cancer Cell Line A549 and Its Mechanism of Signaling Pathway

二维码有效期 120s

摘要目的：研究丙戊酸钠（sodium valproate ，VPA）作为组蛋白去乙酰酶抑制剂对肺癌A549细胞人类M HCⅠ类分子链相关基因A （human M HC classⅠchain‐related A ，M ICA ）蛋白表达的影响，并初步探讨其信号转导机制。方法使用不同浓度的VPA刺激处于对数生长期的肺癌A549细胞，培养24 h后使用RT‐PCR法检测肺癌A549细胞MICA mRNA水平，Western blot法检测MICA蛋白水平，得出最佳VPA刺激浓度。分别以丝裂素活化蛋白激酶（mitogen‐ac‐tivated protein kinase ，MAPK）通路的3条主要通路抑制剂即 ERK1／2抑制剂（PD98059）、p38蛋白激酶抑制剂（SB203580）、JNK抑制剂（SP600125）预处理 A549细胞，再将 VPA依照预定最适浓度分别加入培养24 h。使用 RT‐PCR法检测A549细胞MICA mRNA水平，Western blot法检测MICA蛋白水平。使用ELISA法检测上述各组A549细胞培养上清液中分泌型MICA（sMICA）蛋白水平。结果 RT‐PCR及Western blot检测结果显示加入VPA后A549细胞中MICA mRNA转录水平、MICA蛋白水平均显著升高（均 P＜0.05）；使用p38蛋白激酶抑制剂SB203580、ERK1／2抑制剂PD98059预处理，均能显著减弱VPA诱导的A549细胞MICA mRNA及蛋白水平的提高（P＜0.05）；各组细胞培养上清液中sMICA浓度无差异。结论 VPA能增强肺癌A549细胞MICA蛋白的表达，其机制可能与ERK、p38信号通路有关。