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一水草酸钙晶体介导巨噬细胞炎症反应的体外研究

COM-mediated Inflammation Response of Macrophages In Vit ro

摘要目的:研究一水草酸钙晶体(calcium oxalate monohydrate ,COM )引起的不同表型巨噬细胞的炎症反应。方法在大鼠草酸钙结石模型中研究肾脏巨噬细胞的浸润情况,明确是否存在肾脏炎症。体外分离培养小鼠骨髓源巨噬细胞,流式细胞仪鉴定其细胞表面标志。将巨噬细胞体外分化为 M1和 M2,Real‐time PCR鉴定细胞标志。Real‐time PCR检测COM及损伤标志分子ATP对巨噬细胞IL‐1β表达的影响,ELISA法检测其IL‐1β的分泌。结果在大鼠草酸钙结石模型肾脏切片中,可见大量巨噬细胞浸润,显著多于对照大鼠。体外分离小鼠巨噬细胞,流式细胞仪鉴定表面标志符合巨噬细胞表型,Real‐time PCR鉴定 M1和 M2的标志也符合其相应表型。M1高表达 IL‐1β、CCL2,低表达MR、ARG ;M2高表达MR、ARG ,低表达IL‐1β、CCL2。COM及其损伤分子ATP均可使M1高表达IL‐1β。结论在草酸钙大鼠模型中,巨噬细胞浸润明显,COM和ATP可加重巨噬细胞炎症,并可加重M1的促炎症作用。

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