换一批CXCR4基因慢病毒载体及其过表达骨髓 间充质干细胞株的建立
Construction of Lentivirus Vectorcarrying CXCR4 Gene and Bone Mesenchymal Stem Cells Over-expressing CXCR4 Gene
摘要目的 构建表达大鼠CXCR4基因的慢病毒载体,建立CXCR4基因过表达骨髓间充质干细胞株.方法 PCR克隆CXCR4基因,将其连接到慢病毒表达载体PGMLV-6751上,转染293细胞,将构建的重组慢病毒载体与包装质粒混合物共转染293T细胞,收集病毒悬液,测定滴度,转染SD大鼠骨髓间充质干细胞,以嘌呤霉素进行筛选,定量PCR和Western blot检测转染后细胞目的基因mRNA和蛋白的表达水平.结果 成功构建了表达CXCR4基因的慢病毒载体,病毒滴度为2×108 TU/mL,建立了CXCR4基因过表达的大鼠骨髓间充质干细胞株,经定量PCR和Western blot检测,过表达细胞株CXCR4基因的mRNA和蛋白表达水平均较对照组明显升高(均P<0.05).结论 成功构建携带CXCR4基因的慢病毒载体及CXCR4基因过表达的骨髓间充质干细胞株.
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栏目名称
DOI
10.3870/j.issn.1672-0741.2019.02.009
发布时间
2019-06-21（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金资助项目（(81360289)）
云南省科技厅-昆明医科大 学 联 合 专 项 重 点 项 目 No.2017FE468 （(-180 )）
面 上 项 目（(2012FB076)）
云南省高层次卫生计生技术人才培养项目（(H-2017060)）
昆明医科大学研究生创新基金项目（(2018S048)）
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