5-氮杂-2′-脱氧胞苷对肺癌WIF1、RASSF2A基因表达及细胞凋亡的影响

Effect of 5-Aza-CdR on Expression of WIF1 and RASSF2A Gene and Apoptosis in Lung Cancer

二维码有效期 120s

摘要目的观察在肺腺癌SPC-A-1细胞中5-氮杂-2′-脱氧胞苷(5-Aza-CdR)对WIF1、RASSF2A基因甲基化状态改变的影响,探讨5-Aza-CdR对肺腺癌SPC-A-1细胞凋亡的影响及其可能的抗癌机制.方法将体外培养的人肺腺癌SPC-A-1细胞株分为4组,A组为未加药组(对照组),B、C、D加药组分别加入3、6、12μmol/L的5-Aza-CdR.采用甲基化特异性PCR(MSP)方法检测4组细胞WIF1、RASSF2A基因甲基化状态的差异,RT-PCR法检测4组细胞WIF1、RASSF2A基因mRNA表达水平差异,Western blot检测4组细胞WIF1、RASSF2A蛋白表达水平差异,流式细胞学技术检测各组细胞周期及细胞凋亡率的差异.结果 ①A组细胞检测出WIF1、RASSF2A基因为甲基化状态,B、C、D组均检测出WIF1、RASSF2A为去甲基化状态.②肺腺癌SPC-A-1细胞WIF1、RASSF2A基因mRNA及WIF1、RASSF2A蛋白表达水平低下,经5-Aza-CdR处理后,其表达水平明显增强(均P<0.05).③5-Aza-CdR处理后的细胞凋亡率较未加药组均明显提高,差异有统计学意义(均P<0.05).④5-Aza-CdR处理后的D组细胞WIF1、RASSF2A蛋白表达水平与细胞凋亡率呈正相关(均P<0.05).结论肺癌细胞WIF1、RASSF2A基因呈甲基化状态,5-Aza-CdR具有明显去甲基化作用,可使WIF1、RASSF2A基因重新激活表达,进而促进肺癌细胞凋亡及抑制癌细胞增殖,发挥抗癌作用.