换一批
换一批拟胚体高密度培养促进小鼠胚胎干细胞向心肌细胞分化*
High Density Culture of Embryoid Bodies Enhanced Cardiac Differentiation of Murine Embryonic Stem Cells
摘要 目的探讨拟胚体（EBs）培养密度对小鼠胚胎干细胞（ESCs）心肌细胞分化的影响。方法小鼠ESCs经过悬滴培养后形成EBs后，以高、低密度（120、60个EBs/60 mm组织培养皿）贴壁培养，免疫荧光检测心肌特异性蛋白肌钙蛋白T(TnT)的表达。在不同时间点计算不同密度组搏动EBs百分比；RT-PCR检测Nkx2.5、GATA4、β-MHC及ANF基因表达水平；Western-blot检测TnT及p38表达水平。结果通过悬滴培养法形成的EBs能够出现自发性搏动并且有TnT表达。高密度培养组与低密度培养组相比具有更高的搏动EBs百分比，Nkx2.5、GATA4、β-MHC和ANF基因高表达水平，以及TnT蛋白高表达水平（P＜0.05）。高密度培养组的p38活性更高，使用p38特异性阻断剂SB203580能够降低高密度组搏动EBs百分比和TnT蛋白表达水平。结论 EBs贴壁培养密度是影响ESCs向心肌细胞分化的一个重要因素，EBs高密度培养相比于低密度培养能够获得更大程度的心肌分化，且该现象可能是由p38信号通路所介导。
更多相关知识
关键词
胚胎干细胞细胞计数肌细胞,心脏细胞分化肌钙蛋白Tp38丝裂原活化蛋白激酶类拟胚体embryonic stem cellscell countmyocytes,cardiaccell differentiationtroponin Tp38 mitogen-acti-vated protein kinasesembryoid bodies
主题词
拟胚体(Embryoid Bodies)肌细胞(Muscle Cells)小鼠胚胎干细胞(Mouse Embryonic Stem Cells)肌钙蛋白(Troponin)胚胎干细胞(Embryonic Stem Cells)
DOI
10.3969/j.issn.0253-9896.2013.08.012
发布时间
2013-08-30
基金项目
国家自然科学基金资助项目(项目编号81200119)
中央高校基本科研业务费专项资金
- 浏览310
- 被引3
- 下载30
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
