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1,25（OH）2D3对人肾小球系膜细胞增殖及mTOR/p70s6K表达的影响

Effects of 1,25(OH)2D3 on proliferation and mTOR/p70s6K expressions of human glomerular mesangial cells

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摘要目的：探讨1,25-二羟基维生素D3[1,25(OH)2D3]对人肾小球系膜细胞增殖的影响及其在肾小球系膜细胞调控中对mTOR/p70s6K信号通路的作用。方法体外培养人肾小球系膜细胞，取传代培养至3~7代细胞分为4组：正常对照组（加含5%胎牛血清DMEM培养基），VD组[加1,25(OH)2D310-8 mol/L]，R组（加雷帕霉素5 mg/L），R+VD组[加雷帕霉素5 mg/L及1,25(OH)2D310-8 mol/L]，干预48 h。采用细胞增殖与活性检测试剂盒CCK-8检测细胞增殖情况，流式细胞术检测细胞周期时相分布，免疫荧光法检测细胞中mTOR、p70s6K的表达情况。结果正常对照组、VD组、R组、R+VD组：（1）吸光度值（A450）依次降低，组间多重比较差异均有统计学意义（均P<0.05）；抑制率（IR）依次升高。（2）G1期细胞比例依次增加，S期、G2/M期依次减少，增殖指数（PI）依次降低，除R组与VD组比较差异无统计学意义外，其余组间多重比较差异均有统计学意义。（3）系膜细胞中mTOR、p70s6K蛋白表达强度均依次降低，除R组与VD组比较差异无统计学意义外，其余组间多重比较差异均有统计学意义。结论1,25(OH)2D3可显著抑制人系膜细胞增殖，且其可能通过抑制mTOR/p70s6K信号通路调控肾小球系膜细胞增殖。