荔枝核总黄酮对TGF-β1诱导的大鼠肝星状细胞内NF-κB、α-SMA表达的影响

Effects of the total flavone of litchi chinensis sonn on expressions of NF-κB andα-SMA in TGF-β1 activated rat hepatic stellate cells

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摘要目的：研究荔枝核总黄酮(TFL)对转化生长因子-β1(TGF-β1)诱导的大鼠肝星状细胞T6(HSC-T6)细胞增殖的影响及其相关分子机制。方法0.25%胰蛋白酶消化收集细胞，用含10%FBS的DMEM+5μg/L TGF-β1培养液配成单细胞悬液。（1）MTT法检测细胞增殖活力。将细胞接种于96孔培养板中，设TGF-β1组，对照组（含5‰DMSO），TFL80、160、320、640、800组（80、160、320、640、800 mg/L TFL），每组设3个复孔。加药24、48、72 h后，采用酶标仪测定490 nm处各孔吸光度（A）值并计算细胞抑制率；根据半数抑制质量浓度（IC50）确定后续实验的药物浓度组及药物作用时间。（2）采用PCR和Western blot分别检测HSC-T6细胞核转录因子（NF）-κB、α-平滑肌肌动蛋白（α-SMA）mRNA和蛋白的表达。将细胞接种于10 cm培养皿中，设TGF-β1组，对照组（含5‰DMSO），TFL125、250、500组（125、250、500 mg/L TFL），分组培养48 h后测定。结果同一作用时间点，随着TFL浓度的增高，HSC-T6细胞的A值基本逐渐降低，细胞抑制率逐渐上升。TGF-β1组NF-κB、α-SMA mRNA和蛋白表达量与对照组差异均无统计学意义，TFL125组与TGF-β1组、对照组差异均无统计学意义。随着TFL浓度的增高，HSC-T6细胞NF-κB、α-SMA mRNA和蛋白表达量基本逐渐降低。结论 TFL可抑制活化的HSC-T6细胞增殖，其可能通过抑制NF-κB、α-SMA的表达来发挥抗肝纤维化作用。