换一批ZHX3基因沉默对BMSCs中成骨相关因子表达的影响
Effects of ZHX3 gene silence on the expression of osteoblast-related factors in BMSCs
摘要目的：探讨锌指蛋白和同源框3（ZHX3）基因沉默对骨髓间充质干细胞（BMSCs）中smad3、smad4、RUNX2表达的影响。方法构建ZHX3低表达慢病毒载体并转染大鼠BMSCs（ZHX3沉默组），同时设空载病毒转染BMSCs （载体对照组）及不做任何处理的BMSCs（空白对照组）。荧光显微镜下测定细胞转染率并采用免疫印迹技术鉴定转染是否成功；采用免疫荧光化学和免疫印迹技术定性定量检测ZHX3沉默时smad3、smad4、RUNX2表达情况。结果（1）复苏培养的细胞具有BMSCs表型。（2）转染后，ZHX3沉默组和载体对照组均表达绿色荧光，空白对照组不表达荧光，且沉默组ZHX3基因表达显著低于载体对照组。（3）免疫荧光结果显示，smad3、smad4的阳性表达位于细胞核和细胞质，RUNX2的阳性表达主要定位于细胞核。3组细胞均可见阳性表达细胞，且空白对照组与载体对照组之间荧光强度未见显著差异，但ZHX3基因沉默组的荧光强度显著低于2个对照组。（4）免疫印迹检测smad3、smad4、RUNX2的条带于空白对照组和载体对照组中无显著差异，但均显著高于ZHX3沉默组（P＜0.05）。结论ZHX3基因沉默后BMSCs体外成骨能力延迟，可能通过下调smad3、smad4、RUNX2来发挥作用。
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关键词
DNA结合蛋白质类锌指基因,同源盒转录因子基因沉默间质干细胞smad3smad4RUNX2转录抑制因子-锌指蛋白和同源框3DNA-binding proteinszinc fingersgenes,homeoboxtranscription factorsgene silencingmesenchymal stem cellssmad3smad4RUNX2zinc fingers and homeoboxes 3
分类号
R392.12
栏目名称
DOI
10.11958/j.issn.0253-9896.2015.12.004
发布时间
2016-01-07（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
基金项目
国家自然科学基金资助项目（31170930，81202783）
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