去泛素化酶A20在糖尿病肾病大鼠肾脏及脂多糖诱导的系膜细胞中的表达及变化

Changes of A20 expression in mesangial cells of LPS-induced diabetic nephropathy rat model

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摘要目的：观察去泛素化酶A20在糖尿病肾病（DN）大鼠肾脏及脂多糖（LPS）诱导的系膜细胞中的表达变化及可能的作用机制。方法（1）Wistar雄性大鼠30只，随机均分为2组，模型组给予链脲佐菌素（STZ）60 mg/kg腹腔注射建立早期DN大鼠模型；对照组给予60 mg/kg枸椽酸缓冲液腹腔注射。分析2组6、8周时血糖和尿微量白蛋白变化。HE染色分析2个时间点的肾脏病理变化。采用免疫组化检测A20在肾脏中的表达。（2）体外培养肾脏系膜细胞，采用不同时间（0、2、4、6、12、24、48、72 h）和不同浓度（0.1、1、10μg/L）的LPS处理细胞后，检测A20、核因子（NF）-κB、核因子κB抑制因子（IκB）、IκB激酶γ（IKKγ）、单核细胞趋化蛋白（MCP）-1蛋白及基因的表达变化。结果（1）模型组较对照组血糖和尿微量白蛋白含量均升高（均P<0.01）。模型组肾小管上皮细胞呈玻璃样变，8周时更明显。模型组较对照组A20蛋白在肾小管表达明显减弱，而肾小球中基本无表达，8周时表达更少。（2）IKKγ不同浓度与时间下差异均无统计学意义。与0 h相比，2、4 h时A20蛋白和基因水平呈高表达，6 h后表达降低（均P<0.05）；各时间点NF-κB表达水平均较0 h增高，IκB表达均降低（均P<0.05）。A20和IκB的蛋白和基因表达呈浓度依赖性降低（均P<0.05），NF-κB蛋白和基因以及MCP-1基因表达呈浓度依赖性升高（均P<0.05）。结论A20可通过调节NF-κB信号通路来导致炎症信号通路的持续激活，可能在DN的发生发展中发挥作用。