不同程度间歇低氧对3T3-L1脂肪细胞NF-κB、IL-10和内脂素的影响
Effects of different degrees of intermittent hypoxia on NF-κB, IL-10 and visfatin in 3T3-L1 adipocytes
摘要目的:测定不同程度间歇低氧(IH)处理的脂肪细胞中核因子(NF)-κB、白细胞介素(IL)-10及内脂素水平的变化,探讨IH导致胰岛素抵抗的机制。方法建立阻塞性睡眠呼吸暂停(OSA)模式间歇低氧/再氧合(IH/ROX)细胞模型,将分化成熟的脂肪细胞3T3-L1随机分为10组,包括4个不同程度IH组(IH1、IH2、IH3、IH4,先充入1.5%O245 s,各组分别充入21%O22 min 15 s、4 min 15 s、5 min 45 s、8 min 45 s,每组60个循环)及各自的正常氧对照组(SC1、SC2、SC3、SC4,将各IH组中1.5%O2改为21%O2,其余同IH组处理)、持续低氧组(CH,10%O26 h)及持续正常氧对照组(CC,21%O26 h)。采用双抗夹心酶联免疫吸附试验(ELISA)法测定3T3-L1上清液中IL-10和内脂素水平;采用Western Blotting法测定脂肪细胞内脂素及细胞核NF-κB p65的蛋白水平;采用real-time PCR方法测定脂肪细胞IL-10、内脂素的mRNA水平。结果 IH组和CH组IL-10蛋白及mRNA的表达水平明显低于各自对照组(P<0.01)。IH和CH组NF-κB p65蛋白水平高于各自对照组。IH1、IH2组和CH组内脂素蛋白及mRNA的表达水平高于各自对照组(P<0.01)。结论 IH作为OSA的主要病生理特征,其可能通过导致脂肪细胞NF-κB、IL-10和内脂素的分泌异常,参与OSA患者胰岛素抵抗的发生。
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