藁本内酯调节RhoA/ROCK信号通路对食管癌细胞生物学行为的影响
Effects of ligustilide regulating RhoA/ROCK signaling pathway on biological behavior of esophageal cancer cells
摘要目的 探讨藁本内酯(LIG)对食管癌细胞增殖、凋亡、血管生成拟态及Ras同源基因家族蛋白A(Rho A)/Rho关联含卷曲螺旋结合蛋白激酶(ROCK)信号通路的影响.方法 用浓度为0、12.5、25、50、100、200 μmol/L LIG处理食管癌细胞EC-109,检测细胞活性,筛选适宜浓度进行后续实验.将EC-109细胞分为对照组(Control组),LIG低、中、高浓度组(LIG-L、LIG-M、LIG-H组),LIG高浓度+RhoA激活剂Naciclasine组(LIG-H+Naciclasine组).Edu检测细胞增殖,流式细胞术检测细胞凋亡;观察血管生成拟态;Western blot检测细胞增殖、凋亡相关蛋白及RhoA、ROCK蛋白表达,裸鼠移植瘤实验验证LIG对食管癌肿瘤生长的影响,免疫组化检测移植瘤血管内皮生长因子(VEGF)、RhoA、ROCK表达水平.结果 与Control组相比,LIG-L、LIG-M、LIG-H组EC-109细胞血管拟态管状结构依次减少,Edu阳性率、细胞周期蛋白(Cyclin)D1、细胞增殖核抗原(Ki67)、B细胞淋巴瘤/白血病-2(Bcl-2)、RhoA、ROCK表达依次降低,P21、细胞凋亡率、Bcl-2相关蛋白(Bax)、胱天蛋白酶(Caspase)-3表达依次升高(P<0.05).RhoA激活剂Naciclasine可部分逆转LIG对食管癌细胞增殖、凋亡和血管生成拟态的改善作用.裸鼠移植瘤实验显示,与Control组相比,LIG组裸鼠移植瘤生长减缓,肿瘤体积减小,RhoA、ROCK、VEGF表达水平降低(P<0.05).结论 LIG通过抑制RhoA/ROCK信号通路抑制食管癌细胞的增殖及血管生成拟态,促进食管癌细胞凋亡.
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