根皮苷通过下调miR-125a-5p减轻缺氧/复氧诱导的H9C2细胞氧化应激和凋亡
Phlorizin allevistes oxidative stress and apoptosis of rat cardiac myocytes H9C2 induced by hypoxia/reoxygenation by down-regulating miR-125a-5p
摘要目的 探讨根皮苷对缺氧/复氧(H/R)诱导的大鼠心肌细胞H9C2凋亡和氧化应激的影响及可能机制.方法 体外培养H9C2细胞,用16、32、64 μmol/L根皮苷预处理或转染anti-miR-125a-5p、anti-miR-NC、miR-125a-5p模拟物、模拟物阴性对照后建立H/R模型.CCK-8法测定细胞增殖,流式细胞术评估细胞凋亡,Western blot测定B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)蛋白和Bcl-2相关X(Bax)蛋白表达,比色法检测乳酸脱氢酶(LDH)释放量和超氧化物歧化酶(SOD)活性,实时荧光定量PCR(qRT-PCR)检测细胞中微小RNA-125a-5p(miR-125a-5p)表达.结果 与H/R组比较,低、中及高剂量根皮苷处理后细胞抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达、LDH含量、miR-125a-5p表达依次降低,SOD活性、Bcl-2蛋白表达依次增加(P<0.05).抑制miR-125a-5p表达后,H/R处理细胞的抑制率、凋亡率、Bax蛋白表达及LDH含量降低,SOD活性、Bcl-2蛋白表达增加(P<0.05).miR-125a-5p过表达逆转了根皮苷对H/R刺激H9C2细胞凋亡、增殖及氧化应激的作用.结论 根皮苷可能通过降低miR-125a-5p表达来减轻H/R诱导的H9C2细胞的氧化应激和凋亡.
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