间充质干细胞外泌体对食管癌ECA109细胞生物学行为的影响

Effects of mesenchymal stem cell exosomes on biological behavior of esophageal carcinoma ECA109 cells

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摘要目的探讨间充质干细胞外泌体(MSC-Exos)对食管癌ECA109细胞增殖、凋亡及迁移能力的影响.方法培养人脐带间充质干细胞,提取并分离外泌体,采用透射电镜、纳米粒径测定及表征蛋白(TSG101、CD63)进行鉴定.实验设MSC-Exo组(MSC-Exos与食管癌ECA109细胞共培养)和空白对照组(仅培养食管癌ECA109细胞),分别培养0、24、48 h,采用CCK-8增殖、划痕实验分别检测各组食管癌EAC109细胞增殖、迁移能力;培养48 h后,采用流式细胞仪检测细胞凋亡及细胞周期变化,Western blot检测磷酸化磷酸肌醇3-激酶(p-PI3K)、兔源磷酸化蛋白激酶B(p-Akt)、β-catenin蛋白的表达.结果经鉴定,所得MSC-Exos符合要求标准.细胞培养0 h时,2组细胞增殖能力和迁移愈合率差异均无统计学意义(P＞0.05);培养24 h时,MSC-Exo组细胞增殖能力低于空白对照组(P＜0.05);培养48 h时,MSC-Exo组细胞增殖能力和迁移愈合率均低于空白对照组(P＜0.05).MSC-Exo组细胞凋亡率高于空白对照组,G2+S期细胞比例低于空白对照组(P＜0.05).MSC-Exo组p-PI3K、p-Akt和β-catenin蛋白表达水平均低于空白对照组(P＜0.05).结论 MSC-Exos能够抑制食管癌细胞增殖、迁移,促进细胞凋亡,其对食管癌细胞的抑癌作用可能与抑制PI3K、Akt蛋白的活化、下调β-catenin蛋白表达有关.