基于网络药理学和实验验证探究鲍式层孔菌多酚的抗头颈鳞癌机制
Elucidation of the anti-head and neck squamous cell carcinoma mechanism of Phellinus baumii polyphenol based on network pharmacology and experimental verification
摘要目的 基于网络药理学和体外实验探究鲍式层孔菌多酚(PBP)作用于头颈部鳞状细胞癌(HNSCC)的靶点并分析潜在机制.方法 分别通过中药系统药理学数据库与分析平台(TCMSP)、药物数据库(DrugBank)、基因数据库(GeneCards)、比较毒理基因组学数据库(CTD)和人类孟德尔遗传病数据库(OMIM)筛选PBP的有效成分以及PBP作用于HNSCC的潜在靶点;使用String数据库构建潜在靶点互作网络,并进行两步拓扑分析筛选核心靶点;使用注释、可视化和集成发现数据库对潜在靶点进行富集分析.体外培养人HNSCC细胞系SCC-15和SCC-25,分别采用0、25、50 mg/L PBP干预,通过细胞增殖及毒性检测(CCK-8)、集落形成实验检测细胞的增殖和集落形成能力,Western blot实验检测2种细胞中PBP核心靶点蛋白的表达.结果 PBP的17种有效成分共得到280个靶点,其中有264个是HNSCC相关基因;两步拓扑结构分析得到缺氧诱导因子1A(HIF1A)、肿瘤抑癌基因p53(TP53)、丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(AKT1)、信号转导和转录激活因子3(STAT3)、细胞周期蛋白A2(CCNA2)和Jun原癌基因(JUN)6个核心靶点;富集结果提示PBP可能通过多种通路在HNSCC中发挥作用.体外实验结果显示,随着PBP干预浓度的升高,SCC-15和SCC-25细胞增殖能力和集落形成能力明显下降(P<0.05),同时STAT3、AKT1和CCNA2的蛋白表达水平降低(P<0.05).结论 PBP能够多靶点、多途径地抑制HNSCC的增殖.
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