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穿心莲内酯调控STAT3/GPX4通路对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响

The effect of andrographolide regulating STAT3/GPX4 pathway on proliferation and apoptosis of myeloma cells

摘要目的 探讨穿心莲内酯(Andro)调控信号转导与转录激活因子3(STAT3)/谷胱甘肽过氧化物酶4(GPX4)通路对骨髓瘤细胞增殖和凋亡的影响.方法 将人多发性骨髓瘤细胞(U266细胞)分为骨髓瘤组,Andro低、中、高浓度组,Stattic(STAT3抑制剂)组,Andro高浓度+Colivelin(STAT3激活剂)组.CCK-8法、克隆形成实验检测细胞增殖;流式细胞术检测细胞凋亡;透射电镜观察细胞线粒体形态;检测细胞线粒体膜电位、亚铁离子(Fe2+)、4-羟基壬烯醛(4-HNE)、丙二醛(MDA)、还原型谷胱甘肽(GSH)水平;2′,7′-二氯二氢荧光素二乙酸酯(DCFH-DA)荧光探针检测细胞活性氧(ROS)水平;Western blot检测增殖细胞核抗原(PCNA)、B淋巴细胞瘤-2基因(Bcl-2)/Bcl-2相关X蛋白(Bax)、溶质载体家族7成员11(SLC7A11)、p-STAT3、GPX4蛋白表达.结果 与骨髓瘤组比较,Andro低、中、高浓度组U266细胞线粒体均呈现明显形态学改变,OD450值、克隆形成率、线粒体膜电位、GSH水平及PCNA、Bcl-2/Bax、SLC7A11、p-STAT3/STAT3、GPX4蛋白降低,细胞凋亡率、Fe2+、4-HNE、MDA水平、ROS水平升高(P<0.05);与骨髓瘤组比较,Stattic组U266细胞对应指标变化趋势与上述一致(P<0.05);Colivelin逆转了高浓度Andro对U266细胞铁死亡、凋亡的促进作用,以及对细胞增殖的抑制作用.结论 Andro可能通过抑制STAT3/GPX4通路诱导铁死亡,进而抑制多发性骨髓瘤细胞增殖并促进凋亡.

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