摘要目的 探讨miR-194-5p抑制剂(miR-194-5p antagomir)对2型糖尿病心肌病(DCM)小鼠心肌损伤的保护作用及可能机制.方法 将60只C57BL/6小鼠随机分为正常对照(NC)组、DCM组、DCM+抑制剂阴性对照(DCM+antagomir control)组、DCM+miR-194-5p抑制剂(DCM+miR-194-5p antagomir)组,每组15只.通过高脂饮食联合链脲佐菌素腹腔注射的方式成功构建2型糖尿病小鼠模型.建模成功后,DCM+miR-194-5p antagomir组小鼠按照10 mg/kg的剂量经尾静脉注射溶解于PBS溶液中的miR-194-5p antagomir,DCM+antagomir control组注射同等剂量的溶解于PBS溶液中的antagomir control,每周2次,持续4周.干预结束后12周行心脏超声检测评估心功能;小麦胚芽凝集素(WGA)染色检测心肌细胞横截面积;酶联免疫吸附试验(ELISA)测定心肌组织炎性因子白细胞介素(IL)-6和肿瘤坏死因子(TNF)-α水平;实时荧光定量聚合酶链反应(RT-qPCR)检测miR-194-5p和双特异性磷酸酶9(DUSP9)mRNA表达;透射电镜观察心肌线粒体超微结构;通过生物信息学方法预测miR-194-5p的靶点并进行富集通路分析;双萤光素酶报告基因实验验证miR-194-5p对DUSP9的靶向调控作用;Western blot法检测DUSP9蛋白及丝裂原活化蛋白激酶(MAPK)通路相关分子表达.结果 与NC组相比,DCM组和DCM+antagomir control组左室射血分数(LVEF)和左室短轴缩短率(LVFS)降低,心肌细胞横截面积、凋亡率、炎性因子IL-6和TNF-α水平、磷酸化ERK(p-ERK)、磷酸化p38(p-p38)水平增加(P＜0.05),miR-194-5p mRNA表达升高,DUSP9 mRNA和蛋白表达均下降(P＜0.05),心肌线粒体超微结构损伤加重.与DCM组和DCM+antagomir control 组 相 比,DCM+miR-194-5p antagomir组LVEF和LVFS增加,心肌细胞横截面积、凋亡率、炎性因子水平、p-ERK、p-p38水平降低(P＜0.05),miR-194-5p mRNA表达降低,而DUSP9 mRNA和蛋白表达均升高(P＜0.05),心肌线粒体超微结构损伤减轻.生物信息学预测DUSP9是miR-194-5p的潜在靶点,MAPK信号通路居靶基因显著富集的首位.双萤光素酶报告实验证实miR-194-5p可直接靶向DUSP9的3′-UTR.结论 抑制miR-194-5p 可改善DCM小鼠心肌损伤,其机制可能与靶向上调DUSP9并进一步抑制MAPK信号通路有关.