健脾养肝丸调控肠嗜铬细胞及其TPH1-5-HT信号通路治疗IBS-D大鼠的机制研究
Mechanism study on Jianpi Yanggan Pill in regulating enterochromaffin cells and TPH1-5-HT signaling pathway in treating IBS-D rats
摘要[目的]通过研究健脾养肝丸对腹泻型肠易激综合征(IBS-D)模型大鼠嗜铬细胞/5-羟色胺(EC/5-HT)信号通路表达的影响,进一步探索健脾养肝丸是否通过调节嗜铬细胞(EC)中5-羟色胺(5-HT)的分泌来缓解IBS-D的内脏高敏感(VH),从而揭示其治疗IBS-D的内脏敏感机制.[方法]采用母婴分离结合束缚应激法制备IBS-D大鼠模型,通过粪便评分、粪便含水率测定、腹泻指数检测及内脏敏感性测定法评价IBS-D模型及健脾养肝丸的疗效;采用酶联免疫吸附(ELISA)实验、实时荧光定量聚合酶链反应(qPCR)实验、免疫组化染色、免疫荧光染色及电镜检测EC中5-HT的合成、分泌情况.[结果]与模型组相比,健脾养肝丸高、中、低剂量组降低了 IBS-D大鼠Bristol粪便性状评分、粪便含水量、内脏敏感性、结肠及血清5-HT水平、TPH1的mRNA相对表达量(P<0.05或<0.01),减轻了结肠组织病理损伤,减少了嗜铬粒蛋白A(CgA)阳性表达,且通过健脾养肝丸的治疗,EC呈现椭圆形、分泌颗粒减少.[结论]健脾养肝丸可能通过降低TPH1介导EC重摄取色氨酸分解成为5-羟色胺酸(5-HTP),进而减少5-HT的生成从而降低内脏高敏感.
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