基于NF-κB/NLRP3炎症小体通路通督调神灸减轻脊髓损伤大鼠肠道炎症及肠屏障损伤
Tongdu Tiaoshen moxibustion alleviates intestinal inflammation and barrier injury in spinal cord injured rats based on the NF-κB/NLRP3 inflammasome pathway
摘要[目的]探讨通督调神灸通过调控核因子κB(NF-κB)/NOD样受体热蛋白结构域相关蛋白3(NLRP3)通路减轻脊髓损伤大鼠肠道炎症及屏障损伤的作用机制.[方法]将45只SD大鼠随机分为假手术组、模型组、艾灸组,每组15只,使用改良的Allen's法制备脊髓损伤大鼠模型,艾灸组选取"百会""大椎""命门"督脉要穴进行悬灸,经14d干预后,取结肠组织,采用苏木精-伊红(HE)染色观察病理形态,酶联免疫吸实验(ELISA)检测肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-6(IL-6)、白细胞介素-23(IL-23)、白细胞介素-1β(IL-1β)、白细胞介素-18(IL-18)含量,蛋白免疫印迹法(Western blot)检测核因子-κB p65亚基(NF-κB p65)、CC趋化因子配体2(CCL2)、芳香烃受体(Ahr)、闭合蛋白-1(Claudin-1)、闭锁小带蛋白-1(ZO-1)蛋白表达,RT-qPCR检测NF-κB、NLRP3、半胱氨酸的天冬氨酸蛋白水解酶-1(Caspase-1)mRNA水平.[结果]模型组结肠黏膜结构破坏,炎性细胞浸润,TNF-α、IL-6、IL-23含量显著升高(P<0.05),Claudin-1、ZO-1蛋白表达降低(P<0.05),结肠出现炎症反应,肠屏障受损;模型组NF-κB p65、CCL2蛋白及NF-κB、NLRP3、Caspase-1 mRNA表达显著升高(P<0.05),Ahr蛋白降低(P<0.05);经通督调神灸干预后,艾灸组中上述炎症因子含量降低,屏障蛋白(Claudin-1、ZO-1)及Ahr表达显著回升(P<0.05),NF-κB/NLRP3通路相关分子表达下调(P<0.05).[结论]通督调神灸可通过抑制NF-κB/NLRP3炎症小体通路活化,减少促炎因子释放,上调紧密连接蛋白及Ahr表达,进而减轻SCI后肠道炎症并修复屏障损伤.
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