摘要[目的]基于转化生长因子-β1(TGF-β1)-p38丝裂原活化蛋白激酶(p38MAPK)-环磷腺苷效应元件结合蛋白(CREB)信号通路探讨通心络含药血清对大鼠高葡萄糖环境下心肌成纤维细胞增殖的影响.[方法]原代分离大鼠心肌成纤维细胞,运用免疫荧光染色鉴定细胞.采用甘露醇与葡萄糖作用于细胞不同时间节点,通过细胞增殖及毒性检测(CCK-8)方法检测细胞活力筛选最佳造模时间,造模成功后使用不同浓度的通心络含药血清及阳性药物——缬沙坦含药血清处理细胞.CCK-8方法检测细胞增殖,流式细胞仪检测细胞凋亡,免疫荧光染色检测TGF-β1蛋白表达水平,酶联免疫吸附(ELISA)法检测大鼠心肌组织中半胱氨酸天冬氨酸蛋白酶-3(Caspase-3)、B淋巴细胞瘤-2(Bcl-2)和TGF-β1表达水平,蛋白免疫印迹(Western blot)法检测TGF-β1、磷酸化p38MAPK(p-p38MAPK)、磷酸化CREB(p-CREB)蛋白表达水平.[结果]免疫荧光检测波形蛋白(Vimentin)的表达可以成功鉴定大鼠心肌成纤维细胞,阳性率达到90％以上.54.5 mmol/L甘露醇与25 mmol/L葡萄糖作用于大鼠心肌成纤维细胞的最佳造模时间为48 h.结果表明,模型组细胞增殖力、凋亡率较对照组升高,Caspase-3、TGF-β1、Bcl-2、p-p38MAPK及p-CREB的蛋白表达增加;不同浓度含药血清组及阳性药物含药血清组凋亡率较模型组降低,Cas-pase-3、Bcl-2、TGF-β1、p-p38MAPK及p-CREB的蛋白表达降低,差异具有统计学意义(P＜0.05).[结论]采用甘露醇与葡萄糖可以导致大鼠心肌成纤维细胞损伤,通过不同剂量的通心络含药血清及阳性对照药物——缬沙坦含药血清处理均可以对大鼠心肌成纤维细胞发挥保护作用,其中中剂量通心络含药血清对高葡萄糖环境下大鼠心肌成纤维细胞的修复效果最佳,并可能通过激活TGF-β1/p38MAPK/CREB信号通路发挥保护作用.