姜黄素调节p53/AMPK信号通路对子宫内膜癌细胞系生物学行为的影响
Effects of curcumin on proliferation,migration,invasion and apoptosis of endometrial carcinoma HEC-1-B cells through p53/AMPK signaling pathway
摘要[目的]探究姜黄素对人子宫内膜癌细胞系(HEC-1-B)的增殖、迁移、侵袭及凋亡的影响及其作用机制.[方法]首先,用不同浓度的姜黄素(0、5、10、20、40μmol/L)处理HEC-1-B细胞,噻唑蓝(MTT)法检测对细胞的增殖率;将HEC-1-B细胞分为:空白对照组、腺苷酸活化蛋白激酶(AMPK)抑制剂(compound C)组(10 μmol/L)、姜黄素组(40 μmol/L)以及姜黄素(40 μmol/L)+compound C(10 μmol/L)组,药物作用时间均为48 h,通过MTT法检测HEC-1-B细胞的增殖,划痕实验和Transwell实验分别检测HEC-1-B细胞的迁移和侵袭,流式检测HEC-1-B细胞的凋亡,实时荧光定量逆转录聚合酶链反应(qRT-PCR)检测HEC-1-B细胞中Caspase-3、Bcl-2、Bax mRNA相对表达量,蛋白免疫印迹(Western blot)检测HEC-1-B细胞中cleaved-Caspase 3、Bcl-2、Bax以及AMPK信号通路蛋白的表达情况.[结果]与空白对照组相比,5 μmol/L组中HEC-1-B细胞增殖率没有显著性改变(P>0.05),10、20和40 μmol/L组细胞增殖率均下降(P<0.05),并呈时间-剂量依赖性;与对照组相比,姜黄素组细胞增殖、迁移和侵袭能力均降低而凋亡升高(P<0.05),Caspase-3、Bax表达量升高而Bcl-2表达量降低(P<0.05),同时AMPK和p53磷酸化水平也升高(P<0.05);compound C组中细胞增殖、迁移、侵袭均升高而凋亡降低(P<0.05),Caspase-3、Bax表达量下降而Bcl-2表达升高(P<0.05),p-AMPK和p-p53蛋白表达量降低(P<0.05);姜黄素+compound C组中无论细胞的生物学性状及各蛋白表达情况无明显变化(P>0.05).[结论]姜黄素可能通过p53/AMPK信号通路影响子宫内膜癌HEC-1-B细胞增殖迁移、侵袭和凋亡等生物学功能.
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