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清金益气方对金黄色葡萄球菌诱导大鼠急性咽炎的作用研究

Study on the effects of Qingjin Yiqi Decoction on Staphylococcus aureus-induced acute pharyngitis in rats

摘要[目的]探讨清金益气方对金黄色葡萄球菌(S.aureus)诱导的大鼠急性咽炎(AP)的作用研究.[方法]选取雄性SD大鼠 24 只,随机分为对照组、模型组、清金益气方组(3.4 g/kg)和阿莫西林组(0.36 g/kg),每组 6 只.清金益气方组预给药 3 天后,对照组注射生理盐水,其余大鼠连续 2 天在咽部注射S.aureus(2×107 CFU/天),造模后对照组和模型组继续灌胃生理盐水,清金益气方组和阿莫西林组分别灌胃给药,并持续 7d.末次给药 1h后对大鼠行为学和咽部病变打分.通过埃文斯蓝染色(EB)和苏木精-伊红染色(HE)检测咽部EB染料渗出量及观察咽、气管组织病理学变化.通过血常规分析外周血和气管灌洗液(TLF)中白细胞和中性粒细胞变化.通过流式细胞术统计外周血中T淋巴细胞变化.通过免疫荧光法考察咽组织中E-cadherin表达.通过酶联免疫吸附测定法(ELISA)检测血清中肿瘤坏死因子-α(TNF-α)、白细胞介素-1β(IL-1β)、IL-6、前列腺素E2(PGE2)及免疫球蛋白A(IgA)水平,TLF中分泌型免疫球蛋白A(SIgA)水平,及咽、气管组织和TLF中黏蛋白 5AC(MUC5AC)水平.通过阿利新蓝-过碘酸-雪夫染色(AB-PAS)评估咽组织黏液蛋白表达.采用脂磷壁酸(LTA)刺激人淋巴结转移的肺癌细胞NCI-H292 细胞建立上皮损伤模型,检测QJYQ对E-cadherin,IL-1β和MUC5AC表达的影响.[结果]QJYQ可以显著上调S.aureus诱导的AP大鼠体质量(P<0.001)和胸腺指数(P<0.05),改善大鼠活动能力(P<0.05)和皮毛色泽(P<0.001),降低咽部EB染料渗出量(P<0.01).咽和气管组织上皮血管增多、腺体壁增厚及炎性细胞浸润亦得到明显改善.QJYQ显著降低外周血及TLF中白细胞数目(P<0.05,P<0.001)、中性粒细胞比例(P<0.01),增加CD4+T细胞,降低CD8+T细胞比例,降低IgA水平(P<0.01)以及上调SIgA水平(P<0.001).QJYQ上调咽组织E-cadherin表达及显著降低IL-1β(P<0.001)、PGE2(P<0.05)、TNF-α(P<0.001)和IL-6(P<0.001)含量.QJYQ抑制咽组织黏液蛋白表达,明显抑制咽、气管和TLF中MUC5AC含量(P<0.001,P<0.001,P<0.001).给药QJYQ可以增加NCI-H292 细胞中E-cadherin表达,降低IL-1β(P<0.01)和MUC5AC的表达.[结论]QJYQ可以通过抑制炎症因子水平和MUC5AC表达抑制S.aureus诱导的大鼠AP.

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