谷氨酸损伤体外培养大鼠螺旋神经元中凋亡诱导因子的表达与分布

AIF Distribution and Expression in CuItured SpiraI GangIion Neuron Injured by GIutamate

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摘要目的：观察不同浓度谷氨酸（Glu）损伤螺旋神经元中凋亡诱导因子（apoptosis inducing factor，AIF）的表达与分布变化，探讨利用谷氨酸损伤体外培养螺旋神经元是否与 AIF 凋亡途径相关。方法取40只出生后0～3天 SD 仔鼠螺旋神经元行体外培养，所得培养细胞平均分为正常组和10 mM、20 mM、40 mM Glu 组，正常组仅给予正常 SGNs 培养液培养，其余三组分别加入相应浓度谷氨酸和 SGNs 培养液，培养48 h 后，应用光学显微镜、免疫荧光染色及实时荧光定量 PCR 方法观察四组中 SGN 细胞形态、SGN 中 AIF 的分布及 AIF、钙蛋白酶（cal-pain）、半胱氨酸天冬氨酸3（caspase 3）的表达变化；用 TUNEL 法观察细胞凋亡。结果20 mM 和40 mM Glu 组SGNs 细胞形态改变和细胞凋亡明显，并伴有 AIF 核转位；不同浓度 Glu 组 AIF 和 calpain 基因表达明显高于正常组（P＜0．05），但 caspase 3表达无明显升高（P＞0．05）。结论谷氨酸损伤体外培养的螺旋神经元过程中，AIF 凋亡途径参与了细胞凋亡，calpain 的高表达也促进了兴奋性神经递质对 SGNs 的损伤，但 caspase3途径无明显作用。