摘要基于网络药理学、分子对接及体外实验探讨远志-酸枣仁(Polygalae Radix-Ziziphi Spinosae Semen,PR-ZSS)药对治疗焦虑伴失眠的作用机制.以课题组前期对PR和ZSS的化学成分分析结果为基础,结合数据库获取到PR-ZSS药对和焦虑伴失眠疾病的交集靶点,并对核心靶点和通路进行GO分析和KEGG分析,并采用蛋白分子对接方法,同时采用200 μmol/L皮质酮诱导HT22小鼠海马神经元细胞建立焦虑伴失眠细胞模型,验证PR-ZSS药对的体外作用效果.结果得到PR-ZSS药对活性成分63个,治疗焦虑伴失眠的靶点362个,核心靶点涉及丝氨酸/苏氨酸蛋白激酶1(serine/threonine-protein kinase 1,AKT1)和肿瘤坏死因子(tumor necrosis factor,TNF)等.其作用可能与磷脂酰肌醇3-激酶—蛋白激酶B(phosphatidylinositol 3-kinase-protein kinase B,PI3K-AKT)信号通路等相关.分子对接结果显示,PR-ZSS的4个核心成分与PI3K、AKT、脑源性神经营养因子(brain-derived neurotrophic factor,BDNF)靶点间具有良好的结合能力.细胞实验结果表明,PR-ZSS中剂量组通过提高PI3K、AKT、BDNF及环磷酸腺苷反应元件结合蛋白1(cAMP-response element binding protein 1,CREB1)mRNA 表达,降低炎症因子白细胞介素-6(interleukin-6,IL-6)、IL-1β和TNF的产生,从而明显提高5-羟色胺、去甲肾上腺素、多巴胺及γ-氨基丁酸的含量(P＜0.05或P＜0.01或P＜0.001).综上,PR-ZSS药对治疗焦虑伴失眠的机制可能是通过拟雌内酯、油酸、西伯利亚远志糖A3、4-甲氧基水杨酸成分调控PI3K-AKT信号通路等,并作用于PI3K、AKT、BDNF等靶点.