摘要采用转录组学分析结合细胞实验验证探讨异槲皮苷(isoquercitrin,IQC)治疗实验性类风湿关节炎(rheuma-toid arthritis,RA)的机制.首先通过网络药理学预测IQC及RA的潜在作用靶点,再结合脂多糖(lipopolysaccharide,LPS)诱导的RAW 264.7细胞炎症模型进行IQC的有效浓度筛选及IQC治疗RA的潜在作用靶点转录组学分析,并将两种方法分析得到的三个靶点库进行交集获得核心靶点,随后使用AutoDock分子对接等软件,验证IQC与核心靶点之间的结合能力.最后,采用LPS分别诱导RAW 264.7细胞和成纤维样滑膜细胞(fibroblast-like synoviocytes,FLS)构建炎症模型进行验证.网络药理学结果表明IQC有230个潜在靶点、RA疾病有2 980个靶点,转录组学测序分析鉴定出101个显著差异表达基因,经交集分析最终确定酪氨酸蛋白激酶受体TYRO3(tyrosine-protein kinase re-ceptor TYRO3,TYRO3)为关键作用靶点,且IQC与TYRO3的结合能为-7.1 kcal/mol.细胞实验结果表明IQC有效浓度为0.25～25 μmol/L,且IQC能够抑制RAW 264.7细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)的积累.实时荧光定量PCR和蛋白免疫印记结果显示,IQC可以通过抑制RAW 264.7细胞中TYRO3 mRNA水平显著下调白细胞介素-1β(interleukin-1β,IL-1β)、IL-6、诱导型一氧化氮合酶(inducible nitric oxide synthase,iNOS)等促炎因子基因表达水平及显著上调精氨酸酶-1(arginase-1,ARG-1)、IL-10等抑炎因子基因表达水平,显著下调TYRO3、IL-1β、肿瘤坏死因子-α(tumor necrosis factor-α,TNF-α)蛋白表达量,显著上调IL-10蛋白的表达量,达到抑制RAW 264.7细胞炎症反应的作用;此外,IQC可以显著抑制FLS细胞的迁移侵袭能力以及显著下调FLS细胞中基质金属蛋白酶-1(matrix metallo-proteinase-1,MMP-1)、MMP-3、MMP-9、IL-1β、IL-6、TNF-α mRNA 表达水平及 TYRO3 和 MMP-9 的蛋白表达量,达到抑制滑膜成纤维细胞的炎症反应以及侵袭能力的作用.综上所述,IQC可能通过调控TYRO3受体信号缓解巨噬细胞炎症,阻断成纤维细胞异常活化的关键通路,从而发挥多靶点抗RA作用.