重组改构人肿瘤坏死因子对人胃癌细胞的药效学及其机制研究

Pharmacodynamics and Pharmacological Mechanism of Recombinant Mutant Human Tumor Necrosis Factor in Human Gastric Cancer Cells

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摘要背景:重组改构人肿瘤坏死因子(rmhTNF)与原型TNF-α相比具有高抗肿瘤活性和低毒性的特点.目的:研究注射用rmhTNF对人胃癌细胞的药效学及其机制.方法:体外培养人胃癌细胞株BGC-823和人脐静脉内皮细胞株HUVEC-12,分别以不同浓度的rmhTNF和rhTNF-α进行处理,以MTT实验、软琼脂克隆形成实验、TUNEL染色和流式细胞术分析细胞增殖、凋亡情况和细胞周期分布;以蛋白质印迹法检测BGC-823细胞凋亡相关蛋白表达;以免疫共沉淀技术检测rmhTNF与死亡受体5(DR5)间的相互作用.建立BGC-823细胞裸鼠皮下移植瘤模型,分别予mhTNF、rhTNF-α、5-氟尿嘧啶和0.9%NaCl溶液腹腔内注射,以CD34免疫组化染色检测移植瘤组织微血管密度(MVD).结果:rmhTNF和rhTNF-α对BGC-823和HUVEC-12细胞均有抑制增殖和诱导凋亡作用,并能使G0/G1期细胞进入S期,rmhTNF的作用强于rhTNF-α(P<0.05).rmhTNF组移植瘤组织MVD显著低于其他各组(P<0.05).rmhTNF能使BGC-823细胞procaspase-3、Bax表达上调,Bc1-2表达下调,并能与DR5相互作用.结论:rmhTNF对人胃癌细胞具有抑制增殖、诱导凋亡、影响细胞周期分布和抑制肿瘤血管形成的作用,其机制可能为rmhTNF与DR5结合,从而改变细胞内凋亡相关蛋白水平.