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HT29和HCT116结肠癌细胞无血清培养形成肿瘤干细胞球特性的差异性研究

The difference of tumor stem cell spheres of HT29 and HCT116 colon cancer cells in serum free floating-culture system

摘要目的 比较HT29和HCT116两种结肠癌细胞系中肿瘤干细胞的差异,初步探讨结肠癌干细胞研究模型.方法 以无血清培养法培养HT29和HCT116细胞,观察其在不同时间形成肿瘤干细胞球的差异,用限制性稀释法计算两者的成球率;流式细胞术分析HT29和HCT116细胞系中CD44/CD24的表达情况;裸鼠体内成瘤实验鉴定HT29细胞球与HCT116细胞球成瘤能力.结果 无血清培养法发现HCT116较HT29更易形成肿瘤干细胞球且所需时间更短,即HT29在无血清培养的第7天开始形成规则的球体,而HCT116则在第5天就已形成规则的球体,HCT116成球率(11.4±1.15)%高于HT29( 3.31±0.27)%,且差异有统计学意义(P<0.05);HT29和HCT116中CD44±/CD24 ±各细胞含量有显著差异,结果显示具有干细胞特性的CD44+/CD24-结肠癌细胞在HCT116中所占比例(60.33±5.75)%明显高于HT29( 9.23±2.15)%,差异有统计学意义(t=13.939,P<0.05);体内成瘤实验发现HCT116细胞球在裸鼠体内的成瘤能力明显强于HT29细胞球,HCT116细胞球的成瘤速度及瘤体生长速度都较HT29细胞球快.结论 与HT29相比,HCT116结肠癌细胞系更适合作为肿瘤干细胞研究的模型.

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