换一批
换一批鼠IL-35真核表达载体的构建及在Hepa1-6细胞中的表达
Construction of the Eukaryotic Expression Vector Containing Mouse Interleukin-35 Gene andExpression in Hepa1-6 Cells
摘要目的 构建小鼠IL-35的真核表达载体并使其在小鼠肝癌细胞株Hepa1-6中表达.方法 采用PCR方法从含有小鼠IL-35基因的pET-30a-mIL-35中扩增目的 基因片段,将其克隆到真核表达载体pcDNA3.1/V5-HisB中,经菌落PCR、双酶切鉴定及测序正确后,用脂质体转染方法转染到Hepa1-6细胞中,48h后收集细胞,SDS-PAGE和Western Blotting检测目的 蛋白的表达.结果 经双酶切和测序鉴定证实重组表达载体构建成功,转染入Hepa1-6细胞经SDS-PAGE电泳和Western Blotting证明均得到与预期相对分子量大小相符的蛋白条带.结论 成功构建小鼠IL-35真核表达载体并在Hepa1-6细胞中表达,为进一步研究mIL-35的生物学功能提供了条件.
更多相关知识
分类号
R392.11
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1004-3101.2012.01.013
发布时间
2012-05-03
基金项目
山东省自然基金资助项目（ZR2009CM019）；
潍坊医学院研究生创新基金（YC2008014）
- 浏览118
- 被引0
- 下载4
相似文献
- 中文期刊
- 外文期刊
- 学位论文
- 会议论文
