换一批龙葵韧皮部特异Ⅱ型蛋白酶抑制剂的分离纯化和部分特性分析
Purification and characters' analysis of specific proteinase inhibitorⅡ from phloem of Solanum americanum
摘要龙葵蛋白酶抑制剂Ⅱa(Solanum americanum proteinase inhibitor Ⅱa,SaPIN2a)基因是第一个被发现在植物韧皮部中特异表达的蛋白酶抑制剂Ⅱ(PIN2)基因.以野生型龙葵的茎为材料,经过粉碎→浸提→超滤→(NH4)SO4沉淀→分子排阻层析→离子交换层析→胰蛋白酶亲和层析一系列的处理后,分离纯化得到一个丝氨酸蛋白酶抑制剂,SDS-PAGE结果显示其表观分子量约为20 kDa.对该纯化的丝氨酸蛋白酶抑制剂进行了蛋白质测序工作.结果得到该蛋白N端23个氨基酸残基的序列为:KACTRECGHFSYGICPRSEGSPQ,经过Blast比对分析发现这23个氨基酸残基为成熟型SaPIN2a(即不含信号肽的SaPIN2a)N端序列.
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