山茱萸不同栽培品种的rDNA ITS序列分析
rDNA ITS Sequence Analysis of Different Cultivar Variety of Comus officinalis
摘要为测定山茱萸(Comus officinalis Sieb.et.Zucc.)核糖体DNA的ITS序列,对山茱萸不同栽培品种进行了ITS序列分析.通过实验筛选出一对引物,进行PCR扩增,对扩增产物提取纯化,双脱氧链终止法DNA测序.然后,利用DNAssist Version 2.0软件加手工校正确定JTS1-5.8S-ITS2序列,并进行ITS序列分析.获得了山茱萸的ITS1-5.8S-ITS2完全序列,ITS1为253 bp,5.8S为156 bp,ITS2为273 bp,总共682 bp.7种果型的山茱萸其5.8S基因序列显示高度的一致性,圆柱形果型、长梨形果型、椭圆形果型和纺锤形果型的ITS区序列完全一致,短圆柱形果型在ITS1区3'端及ITS2区5'端各有1个变异位点;短梨形果型在ITS1区5'端有3个变异位点;长圆柱形果型在ITS1区有5个变异位点.结果表明,ITS序列在山茱萸种内比较保守,有的栽培品种之间有较小的差异,此研究为中药山茱萸分子鉴定提供了科学依据.
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