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Hepatitis C virus in human B lymphocytes transformed by Epstein-Barr virus in vitro by in situ reverse transcriptase-polymerase chain reaction

摘要AIM To study persistence and replication ofheltitis C virus (HCV) in patients' peripheralblood mononuclear cells (PBMC) cultured invitro.METHODS Epstein-Barr virus (EBV) was usedto transform the hepatitis C virus from a HCVpositive patient to permanent lymphoblastoidcell lines (LCL). Positive and negative HCV RNAstrands of the cultured cells and growth mediawere detected by reverse transcriptase-polymerase chain reaction ( RT-PCR ) eachmonth. Core and NS5 proteins of HCV werefurther tested using immunohistochemical SPmethod and in situ RT-PCR.RESULTS HCV RNA positive strands wereconsistently detected the cultured cells for oneyear. The negative-strand RNA in LCL cells andthe positive-strand RNA in supernatants wereobserved intermittently. Immunohistochemicalresults medicated expression of HCV NS3 and Cproteins in LCL cytoplasm mostly. The positivesignal of PCR product was dark blue and mainlylocalized to the LCL cytoplasm. The RT-PCRsignal was eliminated by overnight RNasedigestion but not DNase digestion.CONCLUSION HCV may exist and remainfunctional in a cultured cell line for a longperiod.

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作者单位 Institute of Hepatology, People's Hospital, Medical Center of Beijing University, Beijing 100044, China [1]
分类号 R57
栏目名称 ORIGINAL ARTICLES
发布时间 2006-07-31
基金项目
教育部青年基金
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世界胃肠病学杂志(英文版)

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