换一批
换一批摘要目的 利用酵母双杂交技术筛选促凋亡因子BIK的相互作用蛋白.方法 利用PCR在成人肝cDNA文库中扩增BIK全长ORF,构建pDBLeu-BIK载体.转化MaV203,检测细胞毒性和自激活作用,确定His基础表达的3AT浓度,依次转化成人肝cDNA文库.在营养缺陷型培养基上挑去三阳性克隆,进行回转验证,以及利用GST-pull down、co-IP在体内外进行验证.结果 成功构建pDBLeu-BIK载体,转化酵母细胞MaV203,无细胞毒性、无自激活作用,3AT浓度为25mmol/L.经回转实验、GST-pull down、co-IP证实了BIK和细胞因子信号通路抑制因子3(SOCS3)之间具有相互作用.结论 BIK和SOCS3之间的相互作用可能是凋亡调控的新机制.
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栏目名称
论著
DOI
10.3969/j.issn.1004-3594.2009.02.013
发布时间
2009-04-15
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