换一批
换一批摘要目的 探索微小RNA-22(miR-22)对妊娠糖尿病(GDM)患者糖代谢的影响.方法 收集2018-01至2019-01在武警广东总队医院就诊的75例妊娠糖尿病孕妇组的胎盘组织作为观察组(GDM组),75例正常妊娠孕妇作为对照组(HC组).培养人绒毛膜HTR8/Svneo细胞建立细胞模型,检测胎盘绒毛组织和细胞的miR-22表达.用人工合成的miR-22类似物和抑制物(反义寡核苷酸)转染HTR8/Svneo细胞,葡萄糖氧化酶法检测体外细胞摄取葡萄糖能力,Western blot检测细胞胰岛素信号通路上的PI3K、AKT、IRS、萄糖转运体4(GLUT4)的表达.设计构建含目的基因野生型和突变型的质粒,双荧光素酶报告基因系统分析miR-22与靶基因的关系.结果 GDM胎盘组织和高糖组细胞中miR-22表达均明显低于对照组(P<0.05),miR-22表达与胰岛素抵抗指数呈负相关.GDM组织的IRS、PI3K、AKT、Glut4蛋白表达水平明显低于对照组;miR-22表达时,HTR8/Svneo细胞摄糖升高,Glut4表达升高,miR-22表达抑制时,细胞摄糖减少,GLUT4表达下降;miR-22过表达或抑制时,IRS、PI3K、AKT表达明显降低.双荧光素酶报告基因系统实验显示SLC2A4基因(编码GLUT4)是miR-22调节靶点.结论 发生胰岛素耐受时,胎盘绒毛组织和细胞miR-22表达下降,miR-22过表达可以提高体外细胞摄取糖水平,miR-22可能通过调节GLUT4而参与GDM的发病机制.
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