换一批GADD45β基因表达诱导对不同p53状态的肝癌细胞作用
The effect and mechanism of growth arrest DNA damage-inducible gene 45β induction in liver cancer cell lines with different p53 status
摘要目的:体外合成GADD45β基因全序列表达质粒后,研究GADD45β基因表达诱导对呈不同p53状态的肝癌细胞的作用及可能机制.方法:采用RT-PCR法获得GADD45β基因全序列,插入pDrive穿梭克隆载体和pIRES2-EGFP荧光表达载体后大量扩增获得DNA,结合p53全基因表达质粒pp53-EGFP转染HepG2、Hep3B细胞后,以[3H]胸腺嘧啶脱氧核苷掺入法(3H-Tdr)和细胞克隆形成法分析DNA合成变化及细胞生长能力;以双抗体夹心ELISA法测定TGF-β1表达变化.结果:成功合成GADD45β基因全序列和表达质粒,通过流式细胞仪收集转染阳性的荧光表达细胞能显著提高转染效率;转染GADD45β后,具有野生型p53基因的HepG2细胞的细胞克隆形成能力和DNA合成能力明显受到抑制,细胞凋亡明显增加,TGF-β1的表达亦明显受抑.与之相反,缺失p53基因的Hep3B需要同时共转染p53基因后,方出现抑制效应.结论:GADD45β基因能够有效抑制肝癌细胞的生长,其功能需要完整p53基因的辅助和(或)调控.GADD45表达和(或)功能异常,导致p53介导的DNA损伤修复途径异常或阻断,是肝脏细胞恶性转化及形成肿瘤的可能机制.
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分类号
R735.7（消化系肿瘤）
栏目名称
DOI
10.3969/j.issn.1007-9610.2005.02.017
发布时间
2005-05-12（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）
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