日本血吸虫可溶性虫卵抗原对体外培养大鼠腹腔巨噬细胞活化及TNF-α表达的影响

Effect of soluble egg antigen of Schistosoma japonicum on activation and expression of TNF-αin cultred rat peritoneal macrophages in vitro

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摘要目的：观察日本血吸虫可溶性虫卵抗原（SEA）对体外培养的大鼠腹腔巨噬细胞（PMCs）中TNF-α活化及表达的影响。方法：体外培养大鼠PMCs，利用苏木素-伊红染色（ HE染色）、免疫细胞化学染色（ IHC）、RT-PCR以及放免法，对SEA作用后的大鼠PMCs形态变化和TNF-α表达进行观察；同时，制备SEA活化腹腔巨噬细胞条件培养基（ SEA-MCM），利用MTT比色法和3H-脯氨酸掺入法，对经过SEA-MCM作用后的HSC-T6细胞增殖及胶原合成结果进行检测。结果：①大鼠PMCs在LPS（10 mg／L）和SEA（10 mg／L）分别作用3 h、6 h和9 h后，可以使PMCs活化增加，并促进大鼠PMCs TNF-α蛋白表达（ P＜0．05）；②LPS（10 mg／L）和SEA（10 mg／L）分别作用6 h，大鼠PMCs TNF-αmRNA表达增加（ P＜0．05）；③LPS（10 mg／L）和SEA（10 mg／L）分别作用3 h、6 h和9 h，培养上清中TNF-α含量高于阴性对照组（P＜0．05）；6 h和9 h组均高于3 h组（P＜0．05），6 h和9 h组间无明显差别（P＞0．05）；④SEA-MCM促进HSC-T6细胞增殖和胶原合成（P＜0．05）。结论：体外实验证实SEA与LPS在活化大鼠PMCs、促进TNF-α表达和分泌中有相似的作用，这可能与SEA活化大鼠PMCs能明显促进HSC-T6细胞增殖和胶原合成有关。