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顺铂通过调节FTO的表达诱导卵巢颗粒细胞凋亡

Cisplatin induces apoptosis of ovarian granulosa cells by regulating FTO expression

摘要目的:观察顺铂处理人卵巢颗粒细胞KGN后,细胞中脂肪和肥胖相关基因(FTO)的表达水平和细胞凋亡的变化,探讨FTO基因对化疗后KGN细胞凋亡的调控.方法:分别使用0、5、10、15、20 μmol/L顺铂处理KGN细胞24、48、72 h,CCK-8法分析细胞增殖能力变化,流式细胞术检测处理48 h后细胞的凋亡水平,Western blot(WB)法检测细胞中FTO、Bcl-2和Bax蛋白的表达水平.KGN细胞转染针对FTO基因的小干扰RNA(siRNA)(siFTO组),并设立细胞对照组(Control组,只含有脂质体)和siRNA对照组(siNC组,转染阴性对照序列);KGN细胞转染FTO真核表达质粒(FTO组),并设立细胞对照组(Control组,只含有脂质体)和空载体对照组(Vector组,转染空载体).转染后,同时使用5μmol/L顺铂处理细胞48 h;分别采用qRT-PCR和WB法检测各组FTO、Bcl-2和Bax的表达水平.结果:随着顺铂浓度的增加,各处理时间组KGN细胞的增殖能力均逐渐下降(P<0.05).细胞凋亡水平随着顺铂浓度的增加逐渐升高(P<0.05),FTO的表达水平逐渐下降(P<0.05).使用siRNA下调FTO后,抑凋亡蛋白Bcl-2的表达水平下降(P<0.001),促凋亡蛋白Bax的表达水平升高(P<0.001);使用真核表达质粒上调FTO后,抑凋亡蛋白Bcl-2的表达升高(P<0.01),促凋亡蛋白Bax的表达下降(P<0.001).结论:顺铂能够下调KGN细胞中FTO的表达水平,并通过抑制抑凋亡蛋白Bcl-2表达和上调促凋亡蛋白Bax表达,促进KGN细胞的凋亡,提示化疗可能通过FTO表达促进卵巢颗粒细胞凋亡,引起卵巢早衰.

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皖南医学院学报

皖南医学院学报

2024年43卷5期

418-421,425页

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