换一批CDK抑制剂olomoucine对苯并芘引起的16HBE细胞S期阻滞效应的影响
Effect of CDK inhibitor olomoucine on the S-phase arrest induced by benzo(a) pyrene in 16HBE cells
摘要目的 观察 CDK抑制剂olomoucine对苯并芘(BaP)引起的16HBE细胞周期效应的影响,进一步探讨苯并芘影响细胞周期的作用机制.方法 10μmoL/L BaP处理4 h后换含有50μmol/L olomoucine的新鲜培养基,于BaP处理后4、8、12和24 h收获细胞,利用流式细胞术测定细胞周期分布,Western blot方法 分析相关蛋白表达水平的变化.结果 单独BaP作用可导致S期细胞比例增加,单独olomoucine处理可引起GO/G1期细胞比例增加,当给予BaP作用后加入olomoucine处理使得S期细胞增加的比例降低,但是却延长了阻滞时间.同BaP单独处理组相比,给予BaP处理后加入olomoucine使得CDK2表达水平在8和12 h降低,在24 h升高;CyclinE的表达水平明显升高,CyclinA的表达水平没有明显变化;Chk1的磷酸化水平在8 h无改变,而在12和24 h略有下降;p53的表达水平在8 h显著升高,而在12和24 h改变不明显;Cdc25A的表达水平在8 h降低,而在12和24 h改变不明显.结论 olomoucine通过对CDK2活性的抑制减缓了BaP引发的S期阻滞效应,关卡蛋白Chk1、p53、Cdc25A、CyclinE/CDK2参与了响应.
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