换一批
换一批摘要目的 探讨硫酸镍(NiSO4)致原代培养大鼠睾丸间质细胞DNA氧化损伤的作用.方法 选择健康成年雄性Wistar大鼠,采用胶原酶消化以及Percoll分离液梯度密度离心法,经贴壁培养获得高纯度大鼠睾丸间质细胞,采用3β-HSD法鉴定细胞纯度.取对数生长期的间质细胞,分别用浓度为0、250、500和1000μmol/L硫酸镍处理6、12和24 h.采用流式细胞仪检测细胞内活性氧(ROS)水平;分光光度法检测间质细胞抑制羟自由基能力(Anti-OH·),酶联免疫吸附法(ELISA)检测细胞内8-羟基脱氧鸟苷(8-OHdG)含量.结果 经3β-HSD法鉴定,睾丸间质细胞纯度达95％以上.与对照组比较,250 μmol/L硫酸镍处理12h组和500、1000μmol/L硫酸镍各处理组,ROS水平均增高(P＜0.05);250μmol/L硫酸镍处理12和24 h组,以及500、1000 μmol/L硫酸镍各处理组,Anti-OH·均降低(P ＜0.05);500、1000μmol/L硫酸镍处理12和24 h组,8-OHdG含量均增加(P＜0.05).结论 硫酸镍致大鼠睾丸间质细胞DNA氧化损伤可能与其导致间质细胞Anti-OH·降低和ROS水平增加有关.
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