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丙烯酰胺致NB-1细胞突触损伤与SNARE效应相关性研究

The relationship between NB-1 synapse damage and SNARE effects induced by acrylamide

摘要目的构建人神经母细胞瘤NB-1细胞神经元突触损伤的细胞模型,探讨丙烯酰胺(acrylamide,ACR)对神经突触损伤的机制.方法将NB-1细胞通过二丁酰环腺苷酸(db-cAMP)诱导为成熟神经元后,MTT检测ACR不同剂量(0、25、50、100、150、200和250 μg/ml)和不同染毒时间(24、48和72 h)对NB-1细胞相对存活率的影响;免疫印记(westernblot)技术检测神经元突触损伤前后突触素Ⅰ(Synapsin Ⅰ)磷酸化和非磷酸化蛋白表达变化,光学显微镜和电子显微镜记录神经元突触损伤前后形态、结构变化,免疫共沉淀试验确定神经元突触损伤前后N-甲基马来酰胺敏感因子(NSF)附着蛋白受体(SNARE)的结合/解离的变化.结果根据MTT试验结果确定ACR染毒剂量为0、25、50和100 μg/ml,染毒时间为48 h;随着ACR染毒剂量的增加Synapsin Ⅰ磷酸化和非磷酸化蛋白表达降低;在25 μg/ml ACR染毒剂量下可见兴奋性和抑制性神经递质,而在50μg/ml染毒剂量下可见抑制性递质;随ACR染毒剂量的增加SNARE复合体中突触融合蛋白(syntaxin)和突触小体相关蛋白(SNAP-25)呈解离状态.结论 ACR对NB-1细胞突触损伤后,SNARE复合体中syntaxin和SNAP-25结合状态与Synapsin Ⅰ、P-Synapsin Ⅰ蛋白表达降低呈正相关,与P-Synapsin Ⅰ/Synapsin Ⅰ差异性表达呈负相关;突触内特异性神经递质的传递和释放可能与P-Synapsin Ⅰ/Synapsin Ⅰ差异性表达所调控的SNARE复合体的解离状态导致的突触功能损伤相关.

作者 王秀会 ^[1] 孙彦彦 ^[2] 张斌 ^[2] 曹鹏 ^[2] 陈宵 ^[2] 王学生 ^[3] 肖经纬 ^[2] 李斌 ^[2] 学术成果认领

作者单位河北联合大学公共卫生学院,河北唐山063000;中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所;中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学安全与健康重点实验室 ^[1] 中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所;中国疾病预防控制中心职业卫生与中毒控制所化学安全与健康重点实验室 ^[2] 河北联合大学公共卫生学院,河北唐山,063000 ^[3]

关键词丙烯酰胺 NB-1细胞突触素Ⅰ SNARE复合体神经递质 Acrylamide NB-1 cells Synapsin Ⅰ SNARE complex Neurotransmitter

医学主题词突触(Synapses)细胞(Cells)丙烯酰胺(Acrylamide)创伤和损伤(Wounds and Injuries)性(Sex)

分类号 R114（卫生基础科学）

栏目名称

论著

发布时间 2015-06-17（万方平台首次上网日期，不代表论文的发表时间）

基金项目

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