摘要目的 观察经苯代谢物长期处理的K562细胞在撤出苯代谢物后,继续传代培养时的红系分化能力的变化规律.方法 K562细胞分别以5 μmol/L 1,2,4-苯三醇和10 μmol/L氢醌处理4周,每周以联苯胺染色法检测受处理细胞Hemin诱导的红系分化率,评价红系分化能力;处理满4周后,撤出苯代谢物,一部分细胞继续传代培养,持续12周,每2周测定细胞的红系分化能力,另一部分细胞进行单细胞克隆培养,选取红系分化能力较低的细胞株连续传代培养,每2周测定各细胞株红系分化能力.结果 在处理的前3周,苯三醇组和氢醌组K562细胞红系分化能力出现时间依赖性下降,而在处理3和4周后,苯三醇组红系分化率均分别只有对照组的51.1％和50.1％,氢醌组均只有对照组的33.1％和31.4％.4周处理后,洗去苯代谢物,在继续传代培养的前6周,苯三醇组和氢醌组红系分化率均分别稳定地维持在22.3％～23.9％和14.0％～15.6％范围内,此后逐渐回升,但仍然明显低于对照组.经苯代谢物处理4周后再经4周的单细胞克隆培养,获得单细胞起源克隆细胞株,各组来源的细胞克隆的红系分化率分别为:对照组39.1％～49.7％,平均45.7％;苯三醇组4.1％～45.3％,平均20.6％;氢醌组0.8％～28.9％,平均12.7％.如将红系分化率≤10％的单克隆细胞株进行第1轮继续传代培养2周,苯三醇组和氢醌组来源细胞株的平均红系分化率仅有小幅回升.如每处理组每批次各挑选出3个红系分化能力最低的单克隆细胞株,再进行第2轮继续传代培养2周,则单克隆细胞株在刚克隆出来时、第1次和第2次继续传代培养后的平均红系分化率,在苯三醇组来源细胞株中分别为7.5％、8.4％和16.3％,在氢醌组来源细胞株中分别为2.3％、3.4％和7.5％.从每处理组的每批次克隆细胞株中选取红系分化能力最低的细胞株,进行4轮连续传代培养,经最初4周的单细胞克隆培养后、第1次、第2次、第3次和第4次2周继续传代培养后的平均平均红系分化率,在来自苯三醇组的细胞株中分别为6.4％、7.6％、12.8％、16.5％和19.4％,在来自氢醌组的细胞株中分别为1.5％、1.7％、4.9％、7.7％、11.5％.结论 苯代谢物长期处理造成K562细胞红系分化能力下降后,即使没有苯代谢物存在,这种红系分化能力的低下可维持相当长的时间;苯代谢物处理的K562细胞群体中几乎所有单个细胞红系分化能力的下降,只是每个细胞红系分化能力的下降程度有所不同.