摘要目的 应用气-液界面(air-liquid interface,ALI)暴露系统评价汽油发动机尾气(gasoline engine exhaust,GEE)全组分暴露致A549细胞的毒性效应.方法 以洁净空气作为对照组,以3个GEE浓度(VGEE∶V洁净空气=1∶10、1∶5和未稀释GEE)作为暴露组,分别设为低、中和高剂量组.利用ALI暴露系统,以10 ml/min作为暴露流量,在37℃水浴条件下,对A549细胞进行1 h的持续暴露.采用CCK-8(Cell Counting Kit-8)检测法、乳酸脱氢酶(lactate dehydrogenase,LDH)释放法、中性红摄入法(neutral red uptake,NRU)和噻唑蓝(MTT)法检测A549细胞的相对存活率.同时采用DCFH-DA探针检测细胞内活性氧(reactive oxygen species,ROS)生成量,Annexin V-FITC细胞凋亡检测试剂盒检测A549细胞凋亡及坏死率,酶联免疫吸附法(Enzyme Linked ImmunoSorbent Assay,ELISA)测定细胞培养上清液中白介素-1β(Interleukin-1β,IL-1β)、IL-6和IL-8水平.结果 与洁净空气组相比,高剂量GEE组在CCK-8法、LDH释放法和MTT法检测中细胞存活率明显降低,差异有统计学意义(P＜0.05);低、中和高剂量组中A549细胞胞内ROS生成量均明显升高,差异有统计学意义(F=19.799,P＜0.05);中和高剂量组中细胞早期凋亡率明显升高,差异有统计学意义(F=7.072,P＜0.05);低剂量组中A549细胞IL-1β和IL-6分泌水平明显升高,差异有统计学意义(P＜0.05);未发现其余GEE暴露组的指标与洁净空气组比较的差异有统计学意义(P＞0.05).结论 GEE的毒性效应主要表现为引起A549细胞的细胞膜损伤、线粒体损伤、氧化应激、细胞凋亡及促炎症效应,且随着染毒浓度的升高,GEE对A549细胞的毒性增强.