人可溶性血管内皮细胞生长因子受体Flt-1基因在链霉菌中的克隆表达
Cloning and Expression of VEGF Receptor Flt-1 Gene in S.lividans TK24
摘要应用RT-PCR技术,从人脐静脉内皮细胞中扩增出编码人可溶性血管内皮细胞生长因子(VEGF)受体Flt-1胞外区前四个结构域的基因片段,亚克隆至pUCl8质粒进行测序,将目的基因片段连接至链霉菌表达载体pSGLgpp,获得重组质粒pSGLgpp-F,将其转化至Streptomyces lividans TK24, 获得基因工程菌株Sreptomyces lividans (pSGLgpp-F),对其培养上清液进行SDS-PAGE及Western blot分析,结果显示,在63.6kD处有特异性条带出现,表明sFLT-1在链霉菌中获得了成功表达,受体配基结合实验显示表达产物与VEGF可特异性结合,表明其具有配基结合生物活性.
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