大肠杆菌DH5α耐乙酸突变株的选育及其代谢特性研究
Selection of Acetate-Tolerant Mutants from Escherichia coli DH5α and the Metabolic Properties of Mutant DA19
摘要大肠杆菌DH5α是基因工程常用的宿主菌之一,但由于对代谢副产物乙酸十分敏感,影响外源基因的表达效率.为了提高E. coli DH5α乙酸耐受力,采用60Co诱变结合连续培养,逐步提高稀释率和乙酸钠选择压力,于含乙酸钠平板进一步筛选,得到5株对乙酸耐受能力显著增强的突变菌株,具有良好的遗传稳定性,其中DA19显示最强的耐受性能.DA19与DH5α相比,在复合培养基YPS和YPS2G中菌体浓度分别提高17%和5%,最大比生长速率分别提高8%和27%,产乙酸分别减少为6%和59%;在基本培养基中的细胞浓度提高2.4倍,在含10g/L乙酸钠培养基中达到的细胞浓度与不加乙酸钠DH5α的细胞浓度相当.
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