换一批
换一批Man8GlcNAc2糖基化的酿酒酵母菌株的构建
Construction of the Man8GlcNAc2 glycosylation Saccharomyces cerevisiae mutant strain
摘要酿酒酵母糖蛋白的N-糖基化经过高尔基体的修饰后形成聚合度约150-200的甘露寡糖,高尔基体N-糖基化的糖基转移酶Mnn1p和Och1p在甘露寡糖的形成过程中起关键作用.通过同源重组置换敲除了酵母中的MNN1和OCH1基因阻断高尔基体N-糖基化修饰,分离纯化了mnn1 och1突变株中的N-糖蛋白,糖酰胺酶PNGase F酶解释放的N-糖链经过2-氨基吡啶衍生后,利用HPLC和MALDI TOF/MS结合的方法分析了突变株糖蛋白上的N-糖链.结果显示mnn1 och1突变株中的糖蛋白的N-糖链为结构单一的糖链,分子量为1794.66,推测为Man8GlcNAc2.
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主题词
糖基化(Glycosylation)甘露糖(Mannose)蛋白(Egg White)肿瘤转移(Neoplasm Metastasis)酿酒酵母菌(Saccharomyces cerevisiae)
分类号
Q933
栏目名称
遗传学和分子生物学
DOI
10.3321/j.issn:0001-6209.2007.05.008
发布时间
2007-12-03
基金项目
国家自然科学基金
山东省优秀中青年科学家科研奖励基金
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