换一批
换一批大肠杆菌表达的重组猪β_2微球蛋白二级结构的圆二色谱分析
Analyzing secondary structure of β_2 microglobulin in Escherichia coli with circular dichroism spectrum
摘要[目的]研究巴马小型猪β_2微球蛋白(β_2m)的结构和功能.[方法]亚克隆巴马小型猪β_2m的成熟肽部分,并构建与pMAL-p2X的重组质粒,转化大肠杆菌TB1并诱导后,融合表达蛋白分别经过Western blot、纯化及Factor Xa切割,分离纯化单体蛋白.圆二色谱(circular dichroism spectrum,CD)测定蛋白的二级结构.[结果]重组表达的融合蛋白MBP-β_2m大小为53.1 kDa.切割后去除MBP的单体蛋白大小为10.6 kDa.圆二色谱分析单体蛋白β_2m二级结构元件α-螺旋、β-折叠、转角和随机卷曲所含有的氨基酸残基数目分别为0、45、8和45.[结论]分析揭示表达的β_2m具有正确的二级结构,可以用于体外多肽结合等研究.
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