金黄色葡萄球菌hmp基因缺失突变株的构建及抗一氧化氮能力分析
Construction of Staphylococcus aureus RN6390 hmp gene mutant and analysis of NO sensitivity
摘要[目的]构建金黄色葡萄球菌RN6390黄素血红蛋白(flavohaemoglobin,HMP)基因缺失突变株,研究其抗一氧化氮(Nitrie Oxide,NO)能力及其在细菌生物被膜形成中的作用.[方法]根据同源重组技术的原理,利用PCR扩增RN6390的hmp基因上下游同源臂,经过抗生素和温度交替培养筛选hmp基因缺失突变株,利用基因组PCR、定量PCR对突变菌株进行鉴定.以硝普钠(SNP)为NO供体,检测了hmp基因缺失菌株的抗NO能力,并初步研究了hmp基因在生物被膜形成中的作用.[结果]成功构建了RN6390的hmp基因缺失突变株,外源NO能够诱导菌株hmp基因的表达,hmp基因缺失菌株抗NO能力明显下降,但其生物被膜形成能力有明显提高.[结论]获得了RN6390的hmp基因缺失突变株,该突变株的获得为进一步研究hmp基因的生物功能,以及细菌内源性NO的作用奠定了良好的技术平台.
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