布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶对胚胎滋养层细胞的致炎作用

Effects of Brucella phosphoglucomutase on inducing infection of trophoblastic cells

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摘要[目的]本文研究布鲁氏菌磷酸葡萄糖变位酶(pgm)基因缺失株和PGM蛋白对胚胎滋养层细胞(HPT-8)的损伤作用及其引起炎症反应时细胞因子的变化,探讨布鲁氏菌pgm基因的生物学功能.[方法]本文分别用布鲁氏菌pgm基因缺失株和纯化的PGM蛋白感染胚胎滋养层细胞,通过细胞形态学的观察和酶联免疫反应检测其对细胞的损伤作用以及细胞因子的变化.[结果]本实验获得了纯化的PGM蛋白,成功构建了pgm基因缺失株,采用该基因缺失株免疫小鼠后,采集血液分离血清,虎红平板实验和试管凝集实验结果显示为阴性；pgm缺失株和PGM蛋白感染HPT-8细胞均能诱发贴壁细胞脱落；而且pgm基因缺失株侵袭HPT-8细胞的能力较M5-90明显降低.pgm基因缺失株侵袭HPT-8细胞诱导产生的细胞因子IL-6、TNF-α和LDH均高于M5-90对照组,差异极显著(P＜0.01),而细胞因子IL-10的分泌变化不明显,PGM蛋白感染HPT-8细胞时,其细胞因子LDH表达水平高于PBS对照组,差异极显著(P＜0.01),而IL-6、IL-10和TNF-α的表达水平明显低于PBS对照组,差异显著(P＜0.05).[结论]本研究表明,PGM蛋白和pgm缺失株可致胚胎滋养层细胞损伤,且引发滋养层细胞细胞因子的表达变化,为进一步研究布鲁氏菌感染宿主细胞的分子机制奠定了基础.